质谱流式发现MDS干祖细胞新的异常标记 - 《流式中文网语雀分站》

骨髓增生异常综合征（MDS）的特征是造血功能异常、发育异常和外周血细胞减少，但在临床上异质性非常强，有些患者迅速进展为急性髓细胞性白血病（AML），而在另一些患者中，症状较轻、生存期长。尽管在细胞遗传学改变和基因突变的水平上已被有很多发现和分类，但是MDS的发病机理仍不完全清楚。
使用荧光流式细胞仪，已发现MDS患者的免疫表型异常类型和程度与诊断分类的亚型、总体存活率相关。欧洲白血病网最近开发了通过流式细胞术对MDS分类的标准化标准，该标准涵盖了许多最新发现，为流式细胞术的MDS分析提供了相当不错的基础。
质谱分析通过将针对细胞表面和细胞内标记的抗体与重金属原子（而不是荧光素）结合，然后可以通过蒸发和电离细胞并通过飞行时间质谱（ICP-MS）测量与每个细胞结合的每个重金属原子（及其结合抗体）的量来检测和定量这些抗体与细胞的结合，理论上可允许多达120个通道。2020年1月9日，Behbehani GK等人在Cytometry B Clin Cytom上面发表了一篇利用34参数的质谱流式分析MDS的文章，对象包括了高危MDS3名、中危2 MDS 8名、中危1 MDS 6名、低危 MDS 6名、ICUS 3名，方案如下，分A、B两组方案，各34个抗体：

质谱流式，由于参数多，所以需要用聚类的方法去分析不同细胞群，这里主要采用了SPADE、viSNE和X-Shift方法，下图是SPADE分出来的不同细胞群（细胞群名称是需要人工标注的），请记住各群细胞的位置，并且了解红色代表该抗原表达强，蓝色表示抗原表达阴性，黄色是中等（参考左上的颜色条，下图是CD45的表达）：

这么多抗体做了之后，作者发现，有15个CD分子的异常（CD44，CD15，CD34，HLA‐DR，CD11b，CD38，CD33，CD117，CD45，CD64，CD99，CD16，CD7，CD56，CD123）与既往一致，同时又新发现了三个以前未发现的异常：
CD321增高
CD47的减少
红系祖细胞CD99表达增高（11例低危MDS中有4例存在）

里面的图很多，会看的你眼花缭乱，详见文章及其附件（均免费）：

我们只挑其中的关键图来拎一下重点，大家关注下图几个细胞群中颜色偏红的标记，例如HSPC中的CD47、CD34、CD117、CD45、HLA-DR、CD44、CD321，例如Other（主要是红系）中的CD7、CD71、CD235a、CD11b、CD15、CD45、HLA-DR、CD44、CD321、CD99，其它各系看下图体会一下即可：
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这些分析的结果表明，同时分析MDS患者骨髓中的所有细胞群可以发现更多与诊断和预后相关的特征，并可以对MDS进行更客观的表型分类。目前该文章分析的MDS患者数量有限，以后还需要更多的病例来确认。

参考文献：Behbehani GK, Finck R, Samusik N, et al. Profiling myelodysplastic syndromes by mass cytometry demonstrates abnormal progenitor cell phenotype and differentiation [published online ahead of print, 2020 Jan 9]. Cytometry B Clin Cytom. 2020;10.1002/cyto.b.21860. doi:10.1002/cyto.b.21860