SILAC即细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture,SILAC)，其实验原理是在细胞培养基中加入轻、中或重型稳定同位素标记的必需氨基酸(赖氨酸和精氨酸)，通过细胞的正常代谢，使新合成的蛋白带上稳定同位素标签。等量混合各类型蛋白质,酶解后进行质谱分析。通过比较一级质谱图中同位素峰型的面积大小进行相对定量，同时二级谱图对肽段进行序列测定从而进行蛋白鉴定。
技术优点
- 活细胞水平标记技术，标记效果稳定，其标记效率不受裂解液的影响。标记效率较高。
- 样本需求量少，通常每个样品需要几十微克的蛋白量。
- 采用质谱定量，可同时鉴定并定量多种蛋白质。
- 多个样品混合后同时进行分离、酶切和鉴定，后续实验对样品的影响是一致的，减少了实验操作和仪器设备产生的影响，具有精密度和重现性。
- 标记采用的是体内标记技术，接近样品真实状态。
技术平台
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™ Tribrid™
应用领域：
- 机理和调控机制研究
- 动态过程中机制研究
- 疾病标志物的筛选
- 用药及预后标志物筛选
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