蛋白质非标记定量技术(label-free)是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,无需使用昂贵的稳定同位素标签做内部标准,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样品中相应肽段的信号强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。

    技术流程

    Label free - 图1

    服务优势

    • 无需同位素标签做内部标准,实验耗费低。
    • 对样本的操作少,从而使其接近原始状态。
    • 不受样品条件的限制,克服了标记定量技术在对多个样本进行定量方面的缺陷。
    • 对实验操作稳定性、重复性要求高,要求至少做三次技术重复或生物重复。

    同位素标记和非标记定量的比较

    样本标记同位素 样本非标记
    在大样本过程中,难于追踪蛋白丰度 易跟踪蛋白丰度
    低丰度蛋白识别有限 能够鉴别低丰度蛋白
    需提前进行二级质谱蛋白鉴定 可以鉴定差异后再进行二级质谱蛋白鉴定
    实验重复性高 实验重复性低

    技术平台

    Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™ Tribrid™

    应用领域:

    • 机理和调控机制研究
    • 动态过程中机制研究
    • 疾病标志物的筛选
    • 用药及预后标志物筛选