使用circle-map软件鉴定所有样品中的eccDNA,然后使用featurecount软件计算跨Breakpoint的reads数,作为该eccDNA的原始表达值,包括图3中红色所示reads(split reads)和蓝色所示reads(discordant read pair)。使用DESeq2 R包对原始count数进行标准化,并使用bedtools软件进行eccDNA蛋白质编码基因和非编码基因注释。
    3.2 eccDNA表达谱 - 图1
    图3. eccDNA支持证据

    EccDNAid A1(raw) B3(raw) A1 (norm) B3 (norm) gene_name
    chr1:1245571-1246304 1 12 1.5 3.24 TSPAN6
    GeneID description Pathway GO-BP GO-CC GO-MF
    7105 tetraspanin 6 GO:0043123 GO:0016021 GO:0005515

    表4. eccDNA表达谱
    各列说明:
    eccDNAid:eccDNA的id,由染色体,起始坐标,终止坐标组成
    A1-B3(raw):跨break point的原始reads数
    A1-B3(norm):跨break point的标准化reads数
    gene_name:eccDNA相关基因的名字
    strand:eccDNA相关基因的转录方向
    biotype:基因类型,protein_coding:蛋白质编码基因;lncRNA:长链非编码RNA
    GeneID:eccDNA相关基因的entrez gene id
    Synonyms:eccDNA相关基因的别名
    dbXrefs:eccDNA相关基因在其他数据库中的名字
    chromosome,map_location:eccDNA相关基因的染色体及位置
    description:eccDNA相关基因的描述
    GO-BP:基因相关GO biological process term ID及名字
    GO-CC:基因相关GO cellular component term ID及名字
    GO-MF:基因相关GO molecular function term ID及名字